第 7 章、バイオセーフティマニュアル: 除染

生物剤によって汚染された培養物や物体の除染は、微生物研究所で日常的に行われています。 除染は微生物学的安全対策の重要な要素であり、実験室職員（および他の人）を感染から保護したり、外部環境への感染性微生物の放出を防ぐのに役立ちます。 培養生物の汚染を防ぐためには、培地、作業台、設備の汚染除去も必要です。

抗菌剤を使用した作業面、機器、生物学的安全キャビネット、およびその他の無生物の汚染除去は、消毒と呼ばれます。 いくつかの化学薬品が消毒剤として使用されます。 研究室従事者は、これらすべての化学消毒剤に危険が伴うことを覚えておく必要があります。 吸入や皮膚への接触は最小限に抑え、目との接触も避けてください。 これらの化学物質を取り扱うときは、常に適切な手袋と安全メガネを着用してください。

化学的消毒剤に対する微生物の感受性は、微生物の物理的構造および物理的状態（例えば、より耐性のある胞子の状態）によって異なります。 たとえば、マイコバクテリアのワックス状の外側細胞壁は耐性を高めます。 外側キャプシドの脂質が欠如しているウイルスは親水性が高く、一般に親油性ウイルスよりも化学消毒剤に対する耐性が高くなります。 化学消毒剤に対する微生物の耐性の順序を、最も耐性のあるものから最も耐性のないものまで次のページに示します。

以下は、化学消毒剤に対する微生物の耐性を、最も耐性のあるものから最も耐性のないものへと並べたリストです。

* 『Biological Safety: Principles and Practices』、Fleming、DO および Hunt、DL、編、第 4 版 (2006)、ASM Press、ワシントン DC から改作

いくつかの一般的な化学消毒剤の関連情報は、この章の最後に表形式でまとめられています。

オートクレーブでは、加圧下（約 15 psi）の飽和蒸気を使用して、オートクレーブ内の温度を少なくとも 121 °C（250 °F）に達します。 オートクレーブ滅菌は、栄養細菌、細菌胞子、ウイルスを破壊するために使用できます。 生物有害廃棄物の汚染を除去する場合、廃棄物の温度が最低 20 分間で最低 115 °C に達することが推奨されます。 これらの条件を満たすために必要な合計処理時間は、いくつかの負荷要因によって異なります (以下を参照)。 ただし、生物有害廃棄物を除染する場合は、最低 1 時間のオートクレーブ サイクルを使用する必要があります。

オートクレーブ滅菌の有効性を決定する要因は 3 つあります。

温度 - オートクレーブは、約 15 psi の圧力下で蒸気を使用して、少なくとも 121 °C のチャンバー温度を達成します。 オートクレーブチャンバーは 121 °C に達する場合がありますが、これは必ずしも積載物の内部がこの温度に達することを意味するわけではありません。

時間 - 清潔なアイテムの滅菌には、チャンバー温度 121 °C でオートクレーブの最小サイクル時間 20 分 (オートクレーブ サイクルが開始されてすぐに時間は開始されません) が一般的に推奨されます。 ただし、除染を達成するために必要な総処理時間は、積載物コンテナ (熱伝達特性)、積載物に含まれる水の量、積載物の重量などのいくつかの積載要因によって異なります。 負荷が増加すると、効果的な除染を保証するためにより長いサイクル時間が必要になります。 生物有害廃棄物の処理には、少なくとも 60 分のオートクレーブ時間が必要です。 60 分の最低オートクレーブ時間の免除はケースバイケースで検討され、バイオセーフティ責任者または施設バイオセーフティ委員会の承認が必要です。 免除の申請は、バイオハザード廃棄物、オートクレーブの条件、オートクレーブの時間、オートクレーブの有効性試験手順と試験の頻度を説明した書面による SOP とともにバイオセーフティ責任者に提出する必要があります。 いかなる場合でも、30 分未満のオートクレーブ時間は承認されません。

接触 - 熱伝達を最大限に高めるには、蒸気の飽和が不可欠です。 蒸気は負荷のすべての領域に接触する必要があります。 オートクレーブバッグやその他の容器は、十分な接触を確保するために、部分的に開いたままにしておく必要があります（または蒸気が侵入できるようにする必要があります）。 研究によると、バッグの内部に水を追加すると、オートクレーブサイクルの時間と温度のプロファイルが改善され、オートクレーブの滅菌効率が向上することが示されています。

生物有害廃棄物を処分する前に除染するには、特定の要件があります。 生物有害廃棄物に関するオートクレーブ手順については、第 12 章を参照してください。

オートクレーブは、資格のある技術者によって定期的に保守および修理されなければなりません。 さらに、ネバダ州法では、内容積が 5 立方フィートを超えるオートクレーブは認定検査官によって毎年検査されることが義務付けられています。 このサービスは現在、大学の保険会社によって無料で行われています。 EH&S（775-327-5040）に電話して、オートクレーブの検査を予約してください。 オートクレーブの使用に関する追加情報は、ネバダ大学リノ校オートクレーブ安全マニュアルに記載されています。

乾熱は湿熱 (オートクレーブ) よりも効果が低くなります。 より高い温度とより長い接触時間を必要とします。 それにもかかわらず、無水材料および密閉容器の除染には、湿熱よりも乾熱の方が好ましい。 これは、オートクレーブで使用される蒸気の水分成分が無水材料や密閉容器に効果的に浸透しないためです。 これらの材料がオートクレーブ内で到達する最高乾熱相当温度は 121 °C です。 乾熱オーブン内で材料が到達する最高温度は、オーブン内の実際の温度となります。 乾熱オーブンを使用した廃棄物の除染には、160 ～ 180 °C の温度で 3 ～ 4 時間行うことをお勧めします。

この表は、「Laboratory Safety: Principles and Practices」第 2 版 (1995 年)、Diane O. Fleming、John H. Richardson、Jerry J. Tulis、および Donald Vesley 編、米国微生物学会、ワシントン DC からのものです。

濃度: 70-85%

接触時間：10〜30分。

濃度：0.05～0.5％（市販漂白剤5％）

接触時間：10〜30分。

濃度: 0.1-2%

接触時間：10〜30分。

濃度: 0.2-3%

接触時間：10〜30分。

濃度:0.47%

接触時間：10〜30分。

濃度: 4-8%

接触時間：10〜30分。

濃度：2%

接触時間：10〜600分。

ホルムアルデヒドはその刺激性と発がん性があるため、局所排気を十分に行った状態で使用しないでください。

毒素の不活化とは、毒素が機能しなくなり、その毒性効果を発揮できなくなることを意味します。 これは、生物学的物質を生存不能にし、成長、複製、感染、または病気の原因となることができないようにする生物学的因子の不活化とは異なります。 生物学的毒素に使用される不活化方法は、その毒素に特異的でなければなりません。 不活化は、オートクレーブ滅菌などの物理的手段または化学的手段を使用して行うことができます。 BMBL では、生物学的毒素の不活化に関するガイダンスを提供するために、次の表を提供しています。

BMBL から適応されました。 次の表は、「微生物および生物医学研究所におけるバイオセーフティ」、第 5 版 (2009 年)、米国保健福祉省、疾病管理予防センター、国立衛生研究所からのものです。

この表は、「微生物および生物医学研究所におけるバイオセーフティ」、第 5 版 (2009 年)、米国保健福祉省、疾病管理予防センター、国立衛生研究所からのものです。

ND は、利用可能な除染に関する文献から「決定されていない」ことを示します。

第 8 章: バイオセーフティのための実験室の換気